Наша галерея. Посев на возбудителей дерматомикозов (Trichophyton spp., Microsporum spp., Epidermophyton spp.) без определения чувствительности к антимикотическим препаратам Когда назначается исследование

К дерматомикозам относятся трихофития, микроспория, парта (фавус), эпидермофития. Возбудителями являются дерматомицеты, от­носящиеся к несовершенным грибам.

Трихофития. Возбудители относятся к роду Trychophyton. В за­висимости от вида возбудителя развивается поверхностная трихо­фития (стригущий лишай) или глубокая (инфильтративнонагноительная). При стригущем лишае волосы надламываются у самой поверхности кожи, отсюда название болезни. Болеют преиму­щественно дети.

Микроспория. Возбудителем являются грибы рода Microsnoron. Вокруг пораженных волос образуется как бы чехол из мелких спор, отчего волосы кажутся присыпанными мукой. Поражает только де­тей.

Парша (фавус). Возбудителем являются грибы рода Aehorion. По­ражает кожу, волосы, ногти. Возможно поражение лимфатических узлов и внутренних органов. Заболевают преимущественно дети.

Эпидермофнтия. Возбудители из рода Bpidermophyton поража­ют роговый слон эпидермиса, реже ногти, не поражают волосы. Различают паховую эпидермофитию и эпидермофитию стоп. Боле­ют, в основном, взрослые, иногда подростки.

Источником инфекции при дерматомикозах являются больные люди или животные. Заражение происходит при непосредственном контакте и через предметы.

Лабораторную диагностику проводят путем микроскопии пора­женных волос, чешуек кожи и ногтей. В препарате "раздавленной" капли микроскопируют волосы, обработанные горячим 15%-ным раствором щелочи для растворения рогового вещества. Обнаружи­вают под микроскопом отрезки гиф гриба (рис. 48).

В тех случаях, когда микроскопическое исследование не дает результатов, производят посев на среду Сабуро. Рост характерных колоний появляется через 6-8 дней.

Применяются также аллергические внутрикожные пробы.

Кандидозы

Возбудителями являются дрожжеподобные грибы рода Candida, чаще всего Candida albicans.

Дрожжеподобные грибы сходны с дрожжами по морфологии круг­лых и овальных клеток - бластоспор. Отличаются от истинных дрож­жей способностью образовывать псевдомицелий и отсутствием поло­вого способа размножения (Рис. 49).

На плотной среде Сабуро образуют белые сметанообразные ко­лонии, которые при старении врастают в толщу агара.

Кандидоз может возникнуть в результате экзогенного зараже­ния при контакте с больным, через инфицированные предметы, или от носителей, например, при контакте новорожденного и грудного ребенка со взрослым, но часто наблюдается эндогенная инфекция, поскольку Candida albicans является представителем нормальной микрофлоры организма. Эндогенный кандидоз развивается при дисбактериозе или как сопутствующее заболевание при другом хрони­ческом и тяжелом процессе. В возникновении кандидоза большую роль играет длительное применение антибиотиков широкого спект­ра действия, которые подавляют нормальную микрофлору организ­ма, что приводит к дисбактериозу и усиленному размножению гри­бов Candida, обладающих природной устойчивостью к антибиоти­кам.

Кандидозы - профессиональные заболевания лиц, чья работа свя­зана с овощами, фруктами, кондитерскими изделиями из фруктов, а также судомоек и работников бань.

При поверхностных кандидозах на слизистых оболочках полости рта, языка, в углах рта, на слизистой влагалища появляются белые на­леты (молочница). На коже появляются мелкие красные пятна, пу­зырьки, которые превращаются в эрозии.

При глубоких кандидозах поражаются легкие, кишечник, почеч­ные лоханки и мочевой пузырь, возможно развитие сепсиса.

Лабораторная диагностика. Наибольшее значение придают микро­скопическому, серологическому и несколько меньшее - культуральному методу.

Микроскопируют нативные неокрашенные препараты или окрашенные обычными способами. Единичные дрожжевые клетки можно встретить в мокроте, кале, моче здоровых лиц. Патолошческой картине соответствует наличие большого числа почкующихся клеток и особенно нитей мицелия.

Серологические исследования имеют большое значение при по­ражении внутренних органов. Ставят РСК и другие реакции.

Выращивание культуры из исследуемого материала имеет огра­ниченное значение, так как у здоровых лиц при посеве мокроты, мочи, соскобов со слизистых оболочек можно получить рост Candi­da. Получение культуры безусловно доказательно при посеве кро­ви, спинномозговой жидкости, пункчата лимфатических узлов, зак­рытых абсцессов. Посев материала производят на среду Сабуро и выращивают при 30°С. Через 2-3 суток отмечают рост белых сметано образных колоний, при микроскопии - почкующиеся клет­ки, нити мицелия, наличие которых обязательно для отличия от ис­тинных дрожжей. Для лечения применяют декампн, нистатин, лево-рин, клотримазол, флуконазол.

Глубокие микозы

Глубокие микозы: кокцидиоидоз, гистоплазмоз, криптококкоз, бла-стомикозы. Заболевание характеризуется поражением внутренних ор­ганов, часто с диссеминацией процесса.

Пневмоцистоз относится к оппортунистическим микозам. Оппор­тунистическими называют инфекции, возбудителями которых являют­ся условно-патогенные микробы.

Возбудителями пневмоцистоза или пневмоцистной пневмонии яв­ляется Pneumocystis carinii, который относится к бластомицетам (дрож­жевым микроорганизмам). Обнаруживается в легочной ткани, в чистой культуре на питательных средах не получен.

У людей с нормальной иммунной системой P. carinii не вызывает заболевания. Пневмоцистоз развивается при иммунодефицитах. Сре­ди лиц, страдающих СПИДом, пневмоцистная пневмония развивается в 80% случаев. Заболевание наблюдается также у пациентов, по­лучающих иммунодепрессанты с лечебной целью.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопии пато­логического материала. Для окраски применяют метод Романовского-Гимза. Серологическая диагностика - с помощью РИФ и ИФА.

Для лечения применяются триметоприм в сочетании с сульфаме-токсазолом или с диаминодифенилсульфоном.

ПАТОГЕННЫЕ ПРОСТЕЙШИЕ

Простейшие микроорганизмы широко распространены в приро­де, среди них имеются сапрофиты и патогенные виды, вызывающие заболевания у человека и животных. К ним относятся дизентерийная амеба, лямблии, трихомонады, лейшмании, плазмодии малярии, ток-соплазмы и другие.

Дизентерийная амеба

Дизентерийная амеба (Entamoeba histolytica) открыта русским вра­чом Ф.А. Лешем в 1875 г. у больного хроническим колитом.

В цикле развития дизентерийной амебы различают две стадии: 1) вегетативную стадию, к которой относятся большая вегетативная, про­ев етная и предцистная формы; 2) стадия покоя -циста.

Амебная дизентерия -антропоноз. Источником инвазии является человек, больной хронической формой болезни, или но­ситель. Основной меха­низм передачи инвазии -фекально-оральный. Ос­новная роль в заражениии человека принадлежит ци­стам, которые длительно сохраняются во внешней среде.

При попадании в тонкую кишку оболочка цисты разрушается, из нее выходят амебы, которые

размножаются в толстой кишке, внедряются в ее стенку. В кишке образу­ются язвы. Амебы могут с током крови заноситься в печень, лепсие, головной мозг.

Лабораторная диаг­ностика проводится путем микроскопического ис­следования препаратов из испражнений (рис. 50).

Для лечения применя­ют метронидазол и фура-мид.

Лямблии

Возбудитель лямблиоза Lamblia intestinalis был открыт русским уче­ным Д.Ф. Лямблем в 1859 г. Относится к жгутиковым простейшим. Оби­тает в верхних отделах кишечника, в нижних отделах образует цисты. Источником инвазии являются больные люди и носители. Заражение происходит фекально-оральным путем. Заражение лямблиями не все­гда приводит к заболеванию. При большом скоплении лямблии они могут явиться причиной хронического холецистита.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопического ис­следования нативных и окрашенных раствором Люголя препаратов, при­готовленных из дуоденального содержимого (рис. 51). Лямблии культиви­руются на питательных средах с экстрактом дрожжеподобных грибов.

Для лечения применя­ют акрихин и аминохолин.

Трихомонады

Возбудитель трихо­моноза мочеполовой сис­темы - Trichomonas vaginalis. Относится к жгу­тиковым простейшим. Цист не образует. В окру­жающей среде быстро по­гибает. Трихомонады хо­рошо растут на питатель­ных средах в присутствии бактерий, которые слу­жат для их питания.

Для лечения применяют осарсол, аминарсон, фуразолидон и др.

Лейшмании

Возбудители лейшманиозов Leishraania tropica, L. donovani, L. braziliensis относятся к жгутиковым простейшим.

В лабораторных условиях лейшмании культивируются на специальных питательных средах.

Основным резервуаром и источником кожного лейшманиоза явля­ются суслики, песчанки и другие грызуны, висцерального лейшмани­оза - собаки. Инфекция передается при укусе москитов.

Кожный лейшманиоз вызывают два вида лейшмании.

L. tropica minor - возбудитель кожного лейшманиоза городского типа, при котором источником инфекции являются больные люди и собаки. Инкубационный период длительный - 3-6 месяцев. На месте укуса москита появляется бугорок, который медленно увеличивается и изъязвляется. Заболевание длится 1-2 года.

L. tropica major - возбудитель кожного лейшманиоза сельского типа, при котором источником инфекции являются суслики, песчанки и дру­гие грызуны. Инкубационный период короткий, 2-4 недели, формиро­вание бугорка на месте внедрения, изъязвление и рубцевание происхо­дят быстрее.

Висцеральный лейшманиоз вызывается L. donovani, встречается в странах с тропическим климатом.

L. braziliensis вызывает лейшманиоз с поражением кожи носа и сли­зистых оболочек полости рта и гортани.

После перенесения лейшманиоза остается стойкий иммунитет.

Для лечения висцерального лейшманиоза применяют солюсурмин, неостибозан. При кожном лейшманиозе применяют акрихин, амфотери-цин В.

Для профилактики практикуются прививки живой культурой L. tropica major.

Плазмодии малярии

Возбудители относятся к классу споровиков. Малярию у человека вызывают 4 вида малярийных плазмодиев: Plasmodium vivax - возбу­дитель трехдневной малярии, Plasmodium malariae - возбудитель четы­рехдневной малярии, Plasmodium falciparum - возбудитель тропичес­кой малярии, Plasmodium ovale вызывает трехдневную малярию (цвет­ная вклейка рис. 53).

В организме человека (промежуточного хозяина малярийных плаз­модиев) происходит бесполая фаза жизненного цикла (шизогония) па­разитов. Половая фаза их жизненного цикла (спорогония) проходит в организме окончательного хозяина - кровососущего комара рода Anopheles. В результате в теле комара образуются длинные тонкие клет­ки - спорозоиты. Они скапливаются в большом количестве в слюнных железах комара. При укусе комара спорозоиты вместе со слюной ко­мара попадают в кровь человека, затем проникают в печень.

Развитие плазмодиев в организме человека проходит в два цикла: тканевая или внеэритроцитарная шизогония происходит в клетках пе­чени; эритроцитарная шизогония - в эритроцитах.

Тканевый цикл шизогонии происходит в клетках печени и заканчи­вается образованием тканевых мерозоитов, которые разрушают клет­ки печени, поступают в кровь и поражают эритроциты.

Эритроцитарный цикл шизогонии. Тканевый мерозоит, проник­нув в эритроцит, принимает форму кольца, так как в центре его име­ется вакуоль. Цитоплазма его окрашена по Романовскому-Гимза в голубой цвет, ядро - в красный. Мерозоит растет, превращается в шизонт. Шизонт делится, в результате образуются мерозоиты. Эрит­роциты разрушаются, мерозоиты попадают в кровь и поражают другие эритроциты. Некоторые мерозоиты, проникая в эритроцит, превращаются в половые формы, которые с кровью попадают в же­лудок самки комара при укусе ею больного человека.

Продолжительность эритроцитарного цикла развития у P. vivax, P. falciparum и P. ovale - 48 часов, P. malariae - 72 часа. Соответственно этому повторяются лихорадочные приступы: при трехдневной и тро­пической малярии - через сутки, при четырехдневной - через двое су­ток.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопическо­го исследования толстой капли и мазка крови, окрашенных по Рома­новскому-Гимза. Применяется серологическая диагностика.

Для лечения применяют препараты, которые действуют на бес­полые формы плазмодиев (хлорохин, амодахин) и на половые фор­мы (пириметамин, прогуанил, хиноцид, примахин).

Для специфической профилактики малярии разрабатывается вак­цина, содержащая антигены, полученные методом генетической инже­нерии.

Токсоплазма.

Возбудитель токсоплазмоза, Toxoplasma gondii, относится к классу спо­ровиков. Впервые обнаружен Николем и Мансо в 1908 г. у грызунов гонди в Северной Африке.

Промежуточными хозяевами являются, кроме человека, многие виды животных и птиц. В организме промежуточных хозяев токсоплазмы прохо­дят бесполый цикл развития.

Клинические проявления токсоплазмоза разнообразны. Приобретенный токсоплазмоз выражается в поражении лимфатическх узлов, глаз, сердца, лег­ких, кишечника, нервной системы. Часто токсоплазмоз протекает в бессимп­томной форме, при которой, однако, образуются антитела. В клетках ретику-ло-макрофагальной и центральной нервной системы образуются цисты, со­храняющиеся в течение длительного времени без клинических проявлений. Человек, инфицированный токсоплазмами, не выделяет их во внешнюю среду.

Врожденный токсоплазмоз - заболевание тяжелое. У ребенка наблюда­ются поражения центральной нервной системы, глаз, дефекты развития.

Инфицирование плода в ранние сроки беременности приводит к его ги­бели.

Лабораторная диагностика проводится путем микроскопии мазка из па­тологического материала, окрашенного по Романовскому-Гимза. Возможно получение культуры токсоплазм путем внутрибрюшинного заражения мы­шей, с последующим исследованием перитонеального экссудата. В лабора­торной практике обычно применяют серологические методы: РСК, РИФ, РИГА, а также реакцию Себина-Фельдмана, принцип которой состоит в том, что живые токсоплазмы в присутствии антител сыворотки крови больного теряют способность окрашиваться метиленовым синим. Ставится аллерги­ческая проба с токсоплазмином.

Для лечения применяются хлоридин (цараприм), сульфаниламидные пре­параты

Введение 5

Краткий очерк истории развития микробиологии 5

Часть первая

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

Глава 1 Место микроорганизмов среди других живых существ 13

Классификация и систематика 13

Глава 2 Морфология микроорганизмов 15

Бактерии 15

Микоплазмы 21

Риккетсии 21

Хламидии 22

Актин о мид еты 22

Спирохеты 23

Простейшие 25

Глава 3 Методы микроскопического исследования микробов 26

Микроскопия в световом оптическом микроскопе 26

Микроскопия в темном поле 28

Фазовоконтрасшая микроскопия 29

Люминесцентная микроскопия 29

Электронная микроскопия 30

Глава 4 Физиология микроорганизмов 30

Химический cociaB микроорганизмов 30

Метаболизм (обмен вещесгв) микроорганизмов 32

Питание микробов (конструктивный метаболизм) 32

Ферменты 33

Биологическое окисление (энергетический штабо чизм) 34

Рост и размножение микроорганизмов 36

Образование микробами пигментов, ароматических веществ

Светящиеся микроорганизмы 37

Глава 5 Методы культивирования микроорганизмов

Изучение культуральных и биохимических свойств 38

Питательные среды 38

Культивирование и выделение чистых культур аэробных бактерий 39 Культивирование и выделение чистых культур анаэробных бактерий 41 Ку 1ьтивирование других микроорганизмов микоплазм, риккетсий, хламидий, спирохет, грибов, простейших 42 Методы изучения ферментативной активности (биохимических свойств) микроорганизмов 42 Глава 6 Общая вирусология 44 Общая характеристика вирусов,

морфология и структура вирионов 44 Репродукция виру сов 46 Методы культивирования вирусов 48 Глава? Бактериофаги и бактериофагия 49 Структура бактериофагов 50 Взаимодействие бактериофага с бактериальной клеткой 50 Практическое значение бактериофагов 52 Глава 8 Экологическая микробиология (микроэколо! ия) 53 Микрофлора почвы 54 Микроф юраводы 55 Микрофлор а в оз дух а 55 Микроорганизмы пищевых продуктов 56 Микрофлора различных объектов 56 Роль микроорганизмов в круговороте веществ в природе, в возникновении и существовании биосферы 57 Глава 9 Влияние факторов внешней среды на микроорганизмы 60 Влияние физических факторов 61 Влияние химических факторов 62 Влияние биологических факторов 64 Асептика антисептика, дезинфекция, стерилизация 64 Глава 10 Гене гика микроорганизмов 68 Организация генетического материала у бактерий Генотип и фенотип 68 Изменчивость микроорганизмов 69 Генетические рекомбинации 70 Практическое значение учения о генетике микроорганизмов 73 Генетическая инженерия 73 Глава 11 Антибиотики 74 Природные и полусинтетические антибиотики 75 Химиотерапевшческие средства (синтетические антибиотики) 76

Побочные явления при антибиотикотерапии............................................79

Лекарственная устойчивость микробов........".................................:...........80

Глава 12. Микрофлора организма человека..................................................................83

Взаимоотношения микробов и макроорганизма......................................83

Характеристика микрофлоры организма человека..................................84

Значение микрофлоры организма человека. Дисбактериоз...................86

Глава 13. Инфекция..........................................................................................................88

Свойства патогенного микроорганизма.....................................................88

Значение состояния макроорганизма и условий внешней

среды в инфекционном процессе..................................................................91

f Характерные черты инфекционного заболевания...................................92

Формы проявления инфекционного процесса.........................................92

Особенности вирусных инфекций................................................................94

Врожденные инфекции.................................................................................94

Условно-патогенные микроорганизмы.......................................................95

Внутрибольничные инфекции......................................................................95

Главен. Иммунитет.......................................................................................................96

Виды иммунитета. Неспецифические факторы защиты..........................97

Приобретенный иммунитет........................................................................102

Виды и формы приобретенного иммунитета .........................................102

Антигены ...................................................................................................104

Иммунная система организма. .................................................................106

Иммунный ответ (иммуногенез) ............................................................108

Антитела (иммуноглобулины)......... .........................................................110

Аллергия.......... ............................................................................................................... 115

Особенности противовирусного иммунитета.............................................. 118

Иммунодефицитные состояния.....................................................................119

Оценка иммунного статуса организма.........................................................120

Иммунофармакологическме средства.......................................................120

Становление и развитие иммунной системы в онтогенезе.......................121

Реакции иммунитета.....................................................................................123

Реакция нейтрализации токсина антитоксином.... ..............................123

Реакция агглютинации .............................................................................124

Реакция непрямой или пассивной гемагглютинации ..............................125

РеакцияКумбса (антиглобулиновыйтест).................... ..........................125

Реакция преципитации...................................... ..................................... „125

Реакция иммунного лизиса... ..................................................................... 126

Реакция связывания комплемента ............................................................127

Реакции с участием меченых антигенов или антипел... .......................127

Медицинские биологические препараты для диагностики, .

профилактики и терапии инфекционных болезней.....................................130

, Диагностические препараты... .......................................................... 130

Лечебные и профилактические препараты. Вакцины. .....................133

Иммунные сыворотки и иммуноглобулины.. ......................................Л 36

гиь У Часть вторая.

ЧАСТНАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

- f J t У

Методы лабораторной диагностики ч >. инфекционных заболеваний.........................................................................139

ПАТОГЕННЫЕ КОККИ......................................................................................141

Стафилококки........................................................................................................141 ,

Стрептококки.........................................................................................................146

Менингококки........................................................................................................150

Гонококки..........................................................................................................152

СЕМЕЙСТВО КИШЕЧНЫХ БАКТЕРИЙ..........................................................153 1

Эшерихии...........................................................................................................155

Сальмонеллы....................................................................................................158

Сальмонеллы -возбудителибрюшного тифа ипаратифов.. ...........158

Сальмонеллы - возбудители острых гастроэнтероколитов ...........161

" Шигеллы........................................................................................................163

Клебсиеллы........................................................................................................165

J Протеи.................................................................................................................166

Иерсинии........................................................................................................... 167

ХОЛЕРНЫЙ ВИБРИОН......................................................................................... |?2

КАМПИЛОБАКТЕРЫ...........................^

ГЕМОФИЛЬНЫЕБАКТЕРИИ............................................................................175

СИНЕГНОЙНАЯ ПАЛОЧКА.................................................................................178

ЛЕгаОНЕЛЛЫ.;.............................................................................,.................................179

БРУЦЕЛЛЫ..................,.............................................................................................,..181

БАКТЕРИИ ТУЛЯРЕМИИ......................................................................................^!

БАЦИЛЛЫ СИБИРСКОЙЯЗВЫ.........................................................................Л83

КОРИНЕБАКТЕРИИДИФТЕРИИ.............................................................185

МИКОБАКТЕРИИ...................................................................................................188

Микобактерии туберкулеза.............................................................................188

f Микобактерии лепры.......................................................................................191

" АКТИНОМИЦЕТЫ.......................................................................................192

ПАТОГЕННЫЕ АНАЭРОБЫ РОДА CLOSTRIDIUM................................193

Клостридии столбняка 193

Клостридии анаэробной газовой инфекции 195

Клостридии бот\лизма 197

НЬСПОРООЪРАЗУЮЩИЬ АНАЭРОЬЫ 199

ПАТОГЕННЫЕ СПИРОХЕТЫ 200

Трепонемы Возбудше ть сифилиса 200

Боррелии 203

Леигоспиры 205

МИКОПЛАЗМЫ 206

РИККЕГСИИ 208

Возбудитель эпидемического сыпного тифа 208

Возбудитель К> ашхорадки 209

ХЛАМИДИИ 210 ВОЗБУДИТЕЛИ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 212

Вирус гриппа 214

Вирус кори 217

Виру с эпидемического паротита 218

Виру с иммунодефицита человека (ВИЧ) 219

Вирус бешенства 222

Вирус полиомиелита 224 Вирусы Коксаки ECHO и другие энтероеирусы 225

Ротавирусы 226

Виру с краснухи 228

Арбовирусы 229

Вирус натуральной оспы 231

Герпесвирусы 232

Вирусы гепатитов 235

Возбудители медленных вирусных инфекций 239

Онкогенные вирусы 240

ПАТОГЕННЫ!? ГРИБЫ 24 2

ПАТОГЕННЫЕ ПРОСТЕЙШИЕ 246

Возбудители эпидермомикозов являются анаморфы (структуры бесполого размножения) 40 близкородственных видов из трех родов: Epidermophyton (2 вида), Microsporum (16 видов), Trichophyton (24 вида); их телеоморфы (структуры полового размножения) включены в один род Arthroderma. В 1839 г. Ю. Шенляйн впервые описал фавус (паршу) как грибковое заболевание. В 1845 г. Р. Ремак назвал этот гриб Achorion schoenleinii. Позже были открыты другие возбудители эпидермомикозов. Дерматомицеты не относятся к диморфным грибам. Их дифференциация основывается преимущественно на морфологических и культуральных признаках.

Trichophyton

Морфологические и культуральные свойства

Дерматомицеты образуют септированный мицелий со спиралями, ракетовидными вздутиями, артроспорами, хламидоспорами, макро- и микроконидиями. Они подвергаются плеоморфным изменениям в лабораторных условиях, когда теряют способность к пигментообразованию и формированию конидий. Виды различают по пигментации и форме колоний. Дерматомицеты хорошо растут на глюкозном агаре Сабуро.

Для трихофитонов характерны зернистые или мучнистые колонии с обильными микроконидиями, располагающимися гроздьями на терминальных гифах.

Микроспорумы образуют толстостенные или тонкостенные макроконидии, состоящие из 8-15 (М. canis) или 4-6 (М. gypseum) клеток. Их колонии окрашены в желто-оранжевый цвет. При ультрафиолетовом облучении пораженных микроспорумами волос наблюдается флюоресценция светло-зеленым цветом.

Эпидермофитонам присущи 1-5-клеточные булавовидные конидии.

Антигены

Все дерматомицеты - слабые антигены. Гликопротеины клеточных стенок этих грибов являются аллергенами, причем углеводная часть аллергена обусловливает развитие ГНТ, а белковая часть - ГЗТ.

Патогенез и иммунитет

Возбудители эпидермомикозов поражают эпидермис, волосы, ногти вследствие прямого контакта здорового человека с зараженными чешуйками или волосами больного. Гифы грибов затем прорастают в роговой слой, вызывая разнообразные по клиническому проявлению и локализации заболевания. Отдельные случаи заболеваний связаны с контактом людей (особенно детей) с больными собаками и кошками. В редких случаях могут развиваться генерализованные формы эпидермомикозов с поражением обширных областей кожи туловища и головы, с вовлечением лимфатических узлов.

При эпидермомикозах наблюдается развитие гиперчувствительности немедленного (ГНТ) и замедленного типов (ГЗТ). Экология и эпидемиология. Большинство дерматомицетов широко распространено в природе. Одни виды обнаруживаются в почве и никогда не вызывают заболеваний у человека, другие патогенны для людей. Более десятка видов антропофильных дерматомицетов (Т. rubrum, Т. tonsurans и др.) передаются от человека к человеку; другие - зоофильные дерматомицеты (М. canis, Т. verrucocum), патогенные для домашних и диких животных, передаются человеку; третьи - геофильные дерматомицеты (М. gypseum, M. fulvum), обитают в почве, но также способны поражать человека.

Дерматомицеты достаточно устойчивы к воздействию факторов окружающей среды. Некоторые виды встречаются главным образом в определенных географических регионах.

Лабораторная диагностика

Патологический материал (чешуйки кожи, ногтей, волосы, извлеченные из пораженных мест) микроскопируют, предварительно размягчив их в 10-20% растворе КОН. Microsporum образует тесные пласты спор в мозаичном порядке вокруг волос, тогда как Trichophyton - параллельные ряды спор, снаружи (эктотрикс) и внутри (эндотрикс) пораженных волос.

К дерматомицетам группы эктотрикс относят Microsporum audouinii, M.canis, M.gypseum и др.; к группе эндотрикс - Т. gourvilii, Т. tonsurans и др. Одни из них не образуют конидий в волосе, другие редко проникают в волосы, третьи волосы не инвазируют. Волосы, инфицированные Microsporum, флюоресцируют при ультрафиолетовом облучении. Окончательная идентификация дерматомицетов проводится на основании изучения культур, выращенных в течение 1-3 недель на среде Сабуро при 20°С, по морфологическим особенностям мицелия и спор. Для идентификации дерматомицетов с освобождением их от контаминирующих грибов и бактерий используют специальную питательную среду - DTM, которая нашла широкое применение в клинических лабораториях.

Специфическая профилактика отсутствует

Цель занятия. Ознакомить студентов со свойствами возбудите­лей, методами микологического исследования и этапами лабора­торной диагностики трихофитии, микроспории, аспергиллеза, пенициллиоза, мукоромикоза, кандидамикоза, эпизоотического лимфангита, кокцидиоидомикоза.

Оборудование и материалы. Материал от животных, поражен­ных трихофитией и микроспорией, культуры грибов рода Мисог, Aspergillus, Candida на плотной питательной среде Сабуро или др., препаровальные иглы, микологические крючки, предметные и покровные стекла, смесь воды, спирта, глицерина (поровну), 20%-й раствор гидроксида натрия или гидроксида калия, 50%-й водный раствор глицерина, плакаты, таблицы, биопрепараты.

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

Микозы - группа болезней животных и человека, вызывае­мых патогенными микроскопическими грибами. Основные ме­тоды лабораторной диагностики этих болезней: микроскопия, выделение и идентификация грибов-возбудителей.

Дерматомикозы. Заболевания кожи и ее производных. Восприимчивы сельскохозяйственные животные всех видов (преимущественно молодняк), пушные и хищные звери. У людей инфицированию более подвержены дети. Важным фактором за­ражения служит мацерация кожи.

Трихофития. Инфекционное заболевание. Характеризуется появлением на коже округлых или овальных облысевших очагов с мягкими, иногда сухими корочками в области головы. Поражения могут распространяться по поверхности тела животного (рис. 117, 118).

При поверхностной форме размер повреждений 1...5см в диа­метре, иногда развиваются более обширные очаги. Корки легко отделяются вместе со склеенными волосами, под ними на слегка влажной поверхности кожи торчат обломавшиеся волосы, кое-где встречаются папулы и пузырьки.

При глубокой форме болезни наблюдают несколько очагов поражения с ярко выраженными экссудативными и воспалитель­ными процессами, инфильтрацию, большое количество фолликулярных пустул. Встречаются множественные экссудативные поражения. Все очаги покрыты засохшим серозно-гнойным экс­судатом. При удалении корок обнаруживают эрозии. Часто отме­чают осложнения секундарной инфекцией.

Основные возбудители трихофитии: у крупного рогатого ско­та, буйволов, зебу, оленей - Т. verrucosum (син. Т. faviforme ), реже Т. mentagrophytes ; у лошадей - Т. equinum и Т. mentagrophytes; у овец и коз - Т. verrucosum, Т. mentagrophytes ; у свиней - Т. mentagrophytes ; у верблюдов - Т. verrucosum , Т. sarkisovi ; у собак и кошек - Т. mentagrophytes (кошки редко болеют трихофитией); у пушных зверей и кроликов - Т. mentagrophytes , редко Т. verrucosum ; у лабораторных животных (мыши, крысы, хомяки, морские свинки) - Т. mentagrophytes ; у птиц - Т. gallinae . Этот возбудитель известен давно как возбудитель парши (фавуса) пре­имущественно у рода куриных. Раньше болезнь называли «белый гребень».

Микроспория. Инфекционное заболевание кожи и ее произ­водных. Появление очагов поражения сопровождается воспали­тельным процессом, обламыванием и выпадением волос, иногда наблюдают поражение когтей.

Основные возбудители микроспории: у кошек и собак - М. canis (син. М. lanosum ); у лошадей - М. equinum , редко М. distorum и М. gypseum ; у свиней - М. canis ; у пушных зверей, кроликов - М. canis; у лабораторных животных - М. canis ; у крупного рогатого скота и овец - М. canis и М. gypseum . Микро­спорией болеют дикие звери, а также животные зоопарков и цир­ков.

Лабораторная диагностика трихофитии и микроспории основа­на на результатах микологического исследования.

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии и люминесцентного анализа, выделение чистой культуры посевом на специальные питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим свойствам.

Материал для исследования . В лабораторию направляют соскобы с пораженных частей тела животного вместе с корочками и чешуйками, пораженные волосы с участков, граничащих со здоровой кожей.

Чаще готовят неокрашенные (нативные) препараты. Исследуемый материал помещают в чашки Петри, измельчают ножницами и расщепля­ют с помощью скальпеля. Затем кусочки волос, чешуек, корочек переносят на предметное стекло, наносят каплю 20%-го раствора гидроксида натрия или гидроксида калия и слегка подогревают над пламенем горелки до отхождения паров. После этого добав­ляют каплю 50%-го водного раствора глицерина. На приготов­ленный препарат накладывают покровное стекло и просматрива­ют сначала под малым увеличением сухого объектива (х 8), затем с объективом х 40 или с помощью иммерсионной системы.

С целью дифференциации грибов рода Trichophyton и Microsporum учитывают характер расположения спор в поражен­ном волосе (рис. 119, 120) (цепочками или мозаичное), пользуясь следующими критериями:

Люминесцентный анализ заключается в следующем. Исследу­емый материал помещают в чашки Петри на расстоянии 20 см от ртутно-кварцевой лампы ПРК-2 или ПРК-4 с фильтром Вуда и просматривают под ультрафиолетовыми лучами в затемненном помещении. Пораженные возбудителем микроспории волосы дают яркое зеленоватое свечение. Корочки, чешуйки не светятся. Кроме того, с помощью люминесцентного анализа проводят ран­нюю диагностику атипичных и скрытых форм микроспории.

Обнаружение мицелия гриба и различных спор в материале - до­статочное основание для постановки диагноза на дерматомикозы.

Выделение и идентификация культур возбудителей трихофитии и микроспории. Культуры выделяют в сомнительных случаях для подтверждения диагноза. Для получения чистой культуры грибов отдельные волосы или фрагменты кожи, корочки высевают на специальные питательные среды - агар Сабуро, сусло-агар, МПА, содержащий 2 % глюкозы, агар Чапека и некоторые дру­гие. Чтобы освободить исследуемый материал от сопутствующей микрофлоры, перед посевом на питательные среды его обраба­тывают 60%-м этанолом в течение 5...7 мин, а затем дважды от­мывают дистиллированной водой и подсушивают в термостате при 37 °С, или же в питательные среды добавляют антибиотики (пенициллин, стрептомицин и др.) из расчета 100...200 ЕД/мл. Посевы инкубируют при температуре 26...28 °С 20...30сут и бо­лее. У выросших культур грибов изучают культуральные и мор­фологические свойства. Готовят препараты «раздавленная капля» (см. тему 5) и микроскопируют. При идентификации видов гри­бов руководствуются признаками, изложенными в таблице 35.

Биопрепараты . Препарат ТФ-130 (ВИЭВ) и сухая вакцина ЛТФ-130 (ВИЭВ) против трихофитии крупного рогатого скота содержат аттенуированный штамм Trichophyton verrucosum (faviforme).

Вакцина СП-I против трихофитии лошадей из штамма Trichophyton equinum.

Вакцина Триховис (ВИЭВ) сухая против трихофитии овец из штамма Trichophyton verrucosum (вариант автотрофикум).

Вакцину МЕНТАВАК против трихофитии пушных зверей и кроликов готовят из культуры Trichophyton mentagrophytes .

Вакцина Камелвак-ТС против трихофитии верблюдов содер­жит аттенуированный штамм гриба Trichophyton sarkisovi .

Вакцина МИКОЛАМ против трихофитии и микроспории плотоядных животных, нутрий и кроликов.

Поливак-ТМ - инактивированная вакцина против дермато-фитозов собак, включая 8 видов и разновидностей грибов рода Trichophyton и Microsporum .

Вакцина ВАКДЕРМ против дерматофитозов животных пред­назначена для борьбы с микроспорией и трихофитией собак, ко­шек, пушных зверей и кроликов. Готовят из высокоиммуногенных штаммов Microsporum canis , Microsporum gypseum и Trichophyton mentagrophytes.

Аспергиллез. Заболевание домашних и диких птиц, пчел, редко млекопитающих (крупный рогатый скот, овцы, козы, свиньи, ло­шади); восприимчив человек. Характеризуется гранулематозным поражением органов дыхания, в основном легких, нередко абор­тами. В легких при размножении возбудителя формируется аспергиллома. Аспергиллома (аспергиллезная мицетома) - шаро­образная масса мицелия диаметром до 2 см (обычно Aspergillus fumigatus ) и клеточного детрита, заполняющая полости легкого, образовавшиеся вследствие разрушения ткани. В отечественной практике этим термином обозначают любую инфекционную гра­нулему, вызванную видами Aspergillus.

Возбудители аспергиллеза принадлежат к высшим несовер­шенным грибам класса Deuteromycetes , рода Aspergillus, группе го­ловчатых плесеней. Основные возбудители аспергиллеза живот­ных - A. fumigatus, A.flavus, A. niger.

Лабораторная диагностика аспергиллеза основана на результа­тах микологического исследования.

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культу-рально-морфологическим и патогенным свойствам.

Материал для исследования . В лабораторию направляют свежие трупы мелких животных, наложения, узелки, пораженные орга­ны или их кусочки, мокроту, яйца.

. Непосред­ственное обнаружение гриба в неокрашенном или окрашенном препарате имеет значение лишь для предварительного диагноза. При этом выявление характерных для аспергиллов органов пло­доношения особенно ценно и значительно ускоряет лаборатор­ную диагностику. Исследуемый материал помещают в смесь этанола с глицерином и водой поровну или в физиологичес­кий раствор. Препараты микроскопируют, как описано в теме 5, ориентируясь на обнаружение органов плодоношения (рис. 121) - головка, стеригмы со спорами (см. тему 5).

Для посева используют агар Чапека, Сабуро, кровяной, мозговой, кукуруз­ный агары, МПА (рН 5,5...6,5). Гранулематозную ткань обжигают над пламенем, вырезают стерильно кусочки из середины и рас­кладывают их на плотную среду в чашки Петри, а экссудат засе­вают в пробирки со средой, инкубируют при 25 и 37 °С. На 3...5-е сутки на плотных средах образуются характерные для аспергилл колонии (рис. 122... 124).

A.fumigatus на агаре Чапека образует разрастающиеся коло­нии - ровные или шероховатые. Развитый воздушный мицелий придает им войлочный вид белого цвета или, позднее, зеленого. Зрелые культуры в стадии спороношения черного цвета. С обрат­ной стороны колонии бесцветны или желтовато-коричневого цвета. Межвидовая дифференциальная диагностика основана на различиях в строении стеригм и конидий.

В препаратах из культуры можно обнаружить гладкие, корот­кие, зеленого цвета конидиеносцы. Воздушные гифы бывают септированы и без перегородок. Колбообразные вздутия, содер­жащие споры, находятся только в верхней части гифов. У стеригм одноярусное строение. Конидии темно-зеленого цвета, ок­руглые, шиповатые или полушаровидной формы.

A.flavus, A. niger на агаре Чапека формируют широко разраста­ющиеся колонии с обильным спороношением. Цвет колонии за­висит от массы конидий, развивающихся на конидиеносцах. При микроскопии культур обнаруживают бесцветный или светлоок­рашенный септированный мицелий. Часто образуются склероции шаровидной формы, представленные толстостенными клет­ками.

Биопроба. Метод применяют для подтверждения патогенности выделенных культур аспергилл. Кроликам, морским свинкам или белым мышам вводят внутривенно суспензию спор грибов (0,5... 1) 10 6 , что вызывает развитие генерализованного процесса с типичным поражением органов дыхания, почек, сердца. При вскрытии в этих органах обнаруживают множество мелких узел­ков с интенсивным развитием гриба.

Птице скармливают корм, зараженный спорами аспергилла, или проводят ингаляцию спор в дыхательный аппарат.

С помощью микологических исследований дифференцируют аспергиллез от микозов, Вызванных другими плесневыми гриба­ми.

Пенициллиомикоз. Заболевание многих видов животных, воз­никающее на фоне снижения общей резистентности организма и характеризующееся поражением кожи, слизистых оболочек.

Основные возбудители пенициллиомикоза - грибы рода Penicillium: P. crustosum, P. glaucum, P. mycetomagenum.

Лабораторная диагностика пенициллиомикоза основана на ре­зультатах микологического исследования. Диагностика данного микоза затруднена в связи с тем, что грибы рода Penicillium часто выделяют из легких и других тканей при туберкулезе и других инфекциях. Важным признаком для подтверждения диагноза служит обнаружение в очаге поражения элементов гриба, фаго­цитированных макрофагами.

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и патогенным свойствам.

Материал для исследования. В лабораторию направляют пора­женные участки кожи, слизистых оболочек, пораженные органы и ткани от трупов.

Микроскопия препаратов из исходного материала. Препараты «раздавленная капля» исследуют под микроскопом в окрашен­ном (по методам Грама, Циля-Нильсена и др.) и неокрашенном виде.

Важным диагностическим признаком служит обнаружение в нативных препаратах септированного мицелия и конидиеносцев, ветвящихся на вершине один или несколько раз в виде кисточки.

Выделение и идентификация культуры возбудителя. Материал высевают на сусло-агар, агары Чапека, Сабуро и др. и культиви­руют так же, как и возбудителей аспергиллеза и мукоромикоза. У выделенных культур грибов изучают морфологию колоний и внутреннюю структуру (табл. 36).

Биопроба. Заражают кроликов, морских свинок, крыс, белых мышей подкожно. На месте введения культуры грибов-возбуди­телей развивается абсцесс и формируется грануляционная ткань. При внутрибрюшинном и внутривенном введении развивается генерализованный процесс.

Мукоромикозы (мукорозы). Хронические заболевания, вызыва­емые плесневыми грибами. Характеризуются развитием гранулематозного процесса, сходного с туберкулезом, в лимфатических узлах и в легких, реже в других органах и тканях (кожа, ногти, слизистые покровы, пищеварительный тракт, центральная не­рвная система, мозг). К возбудителю мукороза восприимчивы свиньи, лошади, крупный рогатый скот, овцы, пушные звери; из лабораторных животных - морские свинки, мыши; болеют обе­зьяны, тюлени. Мукорозы людей встречаются в виде спорадичес­ких случаев.

Основные возбудители мукоромикоза - грибы видов Мисог mucedo, М. racemosus, Rhisopus nigricans и др.

Лабораторная диагностика мукоромикоза

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбуди­теля по культурально-морфологическим и патоген­ным свойствам.

Материал для исследо­вания . Объектом исследо­вания служат некротизированные ткани, гной, экс­судат, гранулематозные ткани и др.

Микроскопия препара­тов из исходного материа­ла. В препаратах из иссле­дуемого материала в поло­жительных случаях обна­руживают несептированный мицелий. В круглых спорангиях на спорангиеносце видны эндоспоры (рис. 125). Для старого мицелия характерно присутствие хламидоспор.

Рис. 125. Четырехдневная культура Мисог racemosus на агаре Чапека:

1 - мицелий;

2- спорангия;

3- спорангиоспоры внутри спорангии и вне ее;

4- спорангиеносец

Выделение и идентификация культуры возбудителя. Гранулематозную ткань обжигают над пламенем горелки и стерильно выре­зают из середины кусочки, которые раскладывают на поверхнос­ти среды Чапека (в чашках Петри) или других сред. Посевы ин­кубируют при 25...30ºС. Культуры грибов довольно крупные, ак­тивно развиваются на искусственных питательных средах. На третьи сутки приобретают вид войлочных клочковатых серовато-белых колоний (рис. 126), в последующем цвет может изменяться до коричневого или бурого.

Рис. 126. Войлочно-клочковатая серо­вато-белая колония двухдневной куль­туры М. racemosus на агаре Чапека

Биопроба. Метод применяют для изучения патогенности выде­ленных из исходного материала культур гриба. Кроликам, морс­ким свинкам и белым мышам вводят внутривенно, внутримышечно или внутрибрюшинно смыв спор и мицелия чистых куль­тур. Гриб развивается во всех внутренних органах и тканях. Кро­лики погибают через 15...20 дней после внутривенного заражения, мыши - через 5... 15 дней. Чаще поражаются почки, реже печень, сердце, селезенка (абсцессы, некроз эпителия ка­нальцев, разрастание грануляционной ткани).

Кандидамикоз (кандидоз, молочница и др.). Заболева­ние животных и человека. Характеризуется поверхно­стным поражением кожи, слизистых оболочек рото­вой полости, наружных мо­чеполовых органов. Возбу­дитель также вызывает вис­церальный микоз с поражением дыхательных пу­тей, желудочно-кишечного тракта, мочеполовой систе­мы, молочной железы, мы­шечной, костной и сердеч­но-сосудистой систем, ор­ганов зрения. При генера­лизации кандидамикозного процесса могут поражаться многие органы одновре­менно (рис. 127). Следстви­ем кандидамикоза у коров могут быть маститы, эндометриты и аборты.

Рис. 127. Серовато-белые мелкие узелки на слизистой зоба цесаренка, павшего от кандидамикоза

Основные возбудители кандидамикоза - С. albicans и С. tropicalis , реже С. krusei , род Candida , класс Deuteromycetes. Они широко распространены в природе. Наиболее часто их выделяют с поверхности различных фруктов, ягод, овощей. Candida albicans и др. входят в состав нормальной микрофлоры организма челове­ка и животных. Любые наруше­ния функций иммунокомпетентных клеток или нормаль­ного микробного ценоза при­водят к возникновению заболе­вания. С. albicans в основном поражает птиц, кур, гусей, уток, цесарок, индеек, голубей, фазанов и др. Более тяжело боле­ют поросята, телята, ягнята, щенки.

Лабораторная диагностика кандидамикоза основана на резуль­татах микологического исследования.

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой микроскопии, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культу-рально-морфологическим и ферментативным свойствам.

Материал для исследования . Объектом исследования служат пленки, наложения, соскобы со слизистой оболочки, содержи­мое язв и эрозий, кусочки внутренних органов.

Микроскопия препаратов из исходного материала. В тканях жи­вотных С. albicans может образовывать дрожжевые клетки и гифы, обнаружение которых имеет диагностическое значение (рис. 128). Клеточная стенка мицелия в этом случае состоит из трех слоев и значительно уступает по толщине пяти-семислойной структуре дрожжевых клеток.

Выделение и идентификация культуры возбудителя. Материал (кроме внутренних органов) берут стерильной бактериологичес­кой петлей и тщательно растирают петлей или стеклянным шпа­телем по поверхности среды. Кусочки печени, селезенки или по­чек погружают в спирт, обжигают над пламенем спиртовки, а затем из глубины органов вырезают кусочек ткани и проводят им по поверхности плотной среды. Кровь из сердца, содержимое желудка и кишечника, почечной лоханки высевают на агар Сабуро в чашки Петри. Посевы инкубируют при 37° С 24...48 ч до появ­ления на питательной среде колоний (рис. 129, 130).

Идентификацию культур грибов проводят в два этапа.

На первом этапе изучают культурально-морфологические признаки выделенной культуры в первичном посеве на плотной питательной среде (агар Сабуро, МПА с глюкозой) (табл. 37).

На втором этапе для окончательной идентификации грибов рода Candida выделенную культуру высевают на жидкие пита­тельные среды (бульон Сабуро, картофельный, кукурузный агары или на аналогичные жидкие среды - кукурузный или картофель­ный отвар) и определяют культуральные признаки и цитоморфологические особенности. Посев на картофельный и кукурузный агары делают штрихом в толщу среды, разрезая петлей поверх­ность агара. При микроскопии учитывают наличие псевдомицелия, тип роста на этих средах; при­сутствие хламидоспор на кукуруз­ном агаре в чашках Петри исследу­ют при малом увеличении (рис. 131).

Рис. 131. Пятидневная культура С. albicans на кукурузном агаре:

1 - шаровидные хламидоспоры; 2- контурная оболочка хламидоспоры

На жидких питательных средах грибы С. albicans через 24...48 ч вы­зывают помутнение среды и обра­зование рыхлого осадка на дне пробирки. Для грибов С. tropicalis и С. krusei характерны глубинный рост и образование пленки и при­стеночного кольца.

Для дифференциации видов грибов рода Candida определяют ферментативную активность на жидких средах Гисса, содержащих 3 % различных углеводов и инди­катор Андреде. Посевы наблюдают в течение 10... 15 дней, учитывают кислото- и газообразование. Фер­ментативные свойства приведены в таблице 38.

Эпизоотический лимфангит (бластомикоз, африканский сап). Хроническое заболевание животных. Характеризуется пораже­нием лимфатических узлов, лимфатических сосудов и подкож­ной клетчатки с образованием язв, абсцессов и узелков. В отли­чие от дерматомикозов поражены более глубокие слои кожи. Бо­леют однокопытные животные: лошади, мулы, ослы, зарегистри­рованы случаи заболевания этим микозом парнокопытных - верблюдов и КРС (рис. 132).

Возбудитель эпизоотического лимфангита - Histoplasma farciminosus (син. Criptococcus farciminosus ). Классификация криптококка неясна: одни исследователи причисляют его к бластомицетам, другие на основании некоторых биологических данных - к несовершенным грибам.

Лабораторная диагностика эпизоотического лимфангита осно­вана на результатах микологического и серологического исследо­ваний.

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя при микроскопии препаратов-от­печатков из исходного материала, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и серологическим свойствам.

Материал для исследования . В лабораторию направляют содер­жимое абсцессов, гнойный экссудат язв.

Микроскопия препаратов из исходного материала . Готовят пре­парат «раздавленная капля». Чаще микроскопируют неокрашен­ный препарат или красят по Граму или Романовскому-Гимзе. Благодаря окраске гранулы в цитоплазме хорошо различимы. Возбудителя эпизоотического лимфангита относят к дрожжеподобным грибам. В исследуемом материале обнаруживают криптококки - клетки яйцевидной или ли монообразной формы с четко выраженной двухконтурной оболочкой, клетки заострены на одном или обоих концах. Размеры криптококков З...5мкм в длину и 2...3,5 мкм в ширину. В гное находят по 2...3 криптококка, соединенных своими полюсами и иногда образующих цепоч­ки (рис. 133). Часть криптококков можно найти в лейкоцитах (нейтрофилах и макрофагах). Центральная часть криптококков представляет собой гомогенное, полужидкое вещество, содержа­щее одно или несколько (2...4) блестящих зернышек, которые находятся в беспрерывном и оживленном движении.

Необходимо учитывать, что для Н. farciminosus характерен ди­морфизм, т. е. морфология гриба в патологическом материале и в культуре различна.

Выделение и идентификация культуры возбудителя. В сомни­тельных случаях микроскопии материал высевают на питатель­ные среды. Первичное выделение гриба затруднительно, но вы­деленную культуру удается поддерживать сравнительно легко. Гриб выращивают на МППА, глюкозно-глицериновом МПА (со­держание углеводов 2...2,5 %), агаре Сабуро при температуре 25...30°С.

Через 10... 12 дней на плотных питательных средах образуются колонии, сначала мелкие, в последующем более крупные, возвы­шающиеся над поверхностью среды. Колонии складчатые, сухие, кремового, а позднее коричневого цвета. В мазках из культуры дрожжевые клетки не обнаруживают. Вне живого организма гриб развивается в мицелиальной форме. Мицелий септированный, ветвящийся, многоклеточный.

Серологическая диагностика основана на ре­зультатах РСК с сапным антигеном.

Аллергическая диагностика. Для аллергической диагностики лимфангита используют гистоплазмин (Королевой) - фильтрат 3...4-месячной культуры криптококка. При сомнительном ре­зультате лабораторного исследования применяют дифференци­альную диагностику лимфангита и сапа, используя глазную про­бу с маллеином и подкожную пробу с гистоплазмином.

Кокцидиоидомикоз (ревматизм пустыни, долинная лихорадка и др.). Хроническое заболевание животных и человека, характери­зуется гранулематозным поражением лимфатических узлов, иногда легких у крупного рогатого скота и диссеминированной формой процесса со злокачественным течением у собак.

К заболеванию восприимчивы крупный рогатый скот, лоша­ди, ослы, овцы, свиньи, грызуны (мыши, крысы и др.). Описаны заболевания койотов, лам, кенгуру, обезьян, тигров и других животных. Птицы не болеют. Кокцидиоидомикоз человека относят к группе особо опасных микозов.

Возбудитель кокцидиоидомикоза - дрожжевидный почвен­ный гриб Coccidioides immitis .

Лабораторная диагностика кокцидиоидомикоза основана на ре­зультатах микологического и серологического исследований.

Микологическое исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методами световой микроскопии и биопробы, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по культурально-морфологическим и патогенным свойствам.

Материал для исследования . Объектом исследования служат гной, кровь, содержимое очагов поражения и кусочки поражен­ных органов.

Микроскопия препаратов из исходного материала. Из материала готовят препараты «раздавленная капля». При работе с такими препаратами нужно соблюдать предельную осторожность, так как грибы остаются живыми. Можно микроскопировать препа­раты в 10%-м растворе щелочи при подогревании: в этом случае гриб погибает быстро, но происходит деформация сферул. Чтобы избежать заражения исследователя грибом С. immitis , перед мик­роскопией патологический материал рекомендуют залить 10%-м раствором формалина на 10...15 мин. Такая обработка убивает гриб, но не влияет на его морфологические признаки. Положи­тельным результатом считают обнаружение сферул (например, в гное и мокроте) мицелия (рис. 134, 135). Сферулы - образования правильной круглой формы с двухконтурной оболочкой и с мно­гочисленными эндоспорами. Протоплазма зернистая. Диаметр сферулы от 20 до 120 мкм. Эндоспоры мелкие. Иногда обнаружи­вают сферулы с разорванной оболочкой и освобождающимися эндоспорами. Прорастание сферул в мицелий можно наблюдать непосредственно в патологическом материале. Для этого на предметное стекло наносят несколько капель в смеси с физиоло­гическим раствором, покрывают покровным стеклом и для пре­дохранения от высыхания заклеивают парафином по краям. От­сутствие сферул в препаратах при микроскопическом исследова­нии не дает оснований отрицать кокцидиоидомикоз.

Выделение и идентификация культуры возбудителя. Для посева исследуемый материал предварительно обрабатывают антибио­тиками в течение 30...60 мин для подавления бактериального ро­ста. Пенициллин добавляют из расчета 20 ЕД/мл среды, стрепто­мицин - 40 ЕД/мл. Для получения мицелиальной формы гриба в качестве питательной среды используют агар Литмана, агар Са­буро, сусло-агар; для получения дрожжевидной формы - кровя­ной агар, печеночный агар с глюкозой, мартеновский бульон (табл. 39). Культивируют при 25...27 и 35...37 °С.

Биопроба. Заражают нативным материалом и солевой суспензией из чистой культуры гриба. К кокцидиоидомикозу восприимчивы мыши, морские свинки, кролики, собаки, куриные эмбрионы. При развитии патологического процесса в зависимости от метода введе­ния исследуемого материала отмечают различные поражения.

При внутривенном введении культуры гриба развиваются абс­цессы во внутренних органах, гибель животных наступает через 20...30 дней.

При интратрахеальном заражении обнаруживают поражение легких и трахеобронхиальных лимфатических узлов.

При внутрибрюшинном заражении через 7... 10 дней процесс распространяется по брюшине с поражением внутренних органов.

При подкожном и интрацеребральном методах заражения возникает местный процесс с поражением лимфатических узлов.

При интратестикулярном - развивается гнойный орхит. В гное обнаруживают сферулы различных размеров и на разных этапах созревания, реже мицелий.

Двух-трехдневные куриные эмбрионы погибают через 3...6 дней после заражения. Использованные в работе материалы и инструменты подлежат немедленной стерилизации в автоклаве.

Серологическая диагностика основана на ре­зультатах следующих реакций: РА с антигеном из убитой культу­ры, РСК с кокцидиоидином, РП с полисахаридным антигеном.

При работе с С. immitis необходимо соблюдать правила техники безопасности, в частности надевать марлевые маски. Посевы про­водить лучше в пробирки со средой Литмана, мясо-пептонный бу­льон или другие жидкие среды, так как их удобнее использовать для микроскопических работ и заражения животных. На этих сре­дах гриб образует более компактные, непылящие колонии. Пере­сев с твердых сред рекомендуют делать до начала спороношения.

ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ

1. Приготовить и промикроскопировать препараты из матери­ала от животных, больных дерматомикозом.

2. Изучить культуральные свойства возбудителей трихофитии и микроспории.

3. Изучить культурально-морфологические характеристики грибов родов Mucor, Aspergillus, Candida.

4. Ознакомиться с биопрепаратами.

Контрольные вопросы

1. Какие микроорганизмы вызывают дерматомикозы?

2. Какова схема лабораторного исследования на дерматомикозы?

3. По каким критериям дифференцируют грибы родов Microsporum и
Trichophyton?

4. Какие плесневые и дрожжеподобные грибы вызывают микозы?

5. Какие вакцины применяют против дерматомикозов сельскохозяйственных
животных?

А) Характеристика методів візуалізації сечової системи, показання до застосування, їх можливості та обмеження.

Анатомічна та фізіологічна характеристика ретикулярної формації

Анатомо- фізіологічна характеристика білої та сірої речовин спинного мозку.

Область применения

Настоящие методические указания предназначены для организаций независимо от их организационно-правовой формы и формы собственности, осуществляющих дезинфекционные мероприятия, а также для организаций, проводящих надзор и производственный контроль применения дезинфицирующих средств (ДС). Документ устанавливает порядок проведения дезинфекционных мероприятий в инфекционных очагах, лечебно-профилактических организациях микологического профиля, а также дезинфектологические меры профилактики дерматомикозов в коммунальной сфере - гостиницах, общежитиях, прачечных, парикмахерских, банях, санпропускниках, спортивных комплексах; детских учреждениях и др.

Методические указания включают вопросы организации и проведения дезинфекционных мероприятий в указанных объектах, а также современные подходы к выбору и применению средств и методов дезинфекции в конкретных условиях их использования.

Общие сведения

Характеристика возбудителей дерматомикозов

Дерматомикозы (дерматофитии) - поверхностные заболевания кожи и ее придатков (волосы, ногти), вызываемые микроскопическими грибами - дерматомицетами (дерматофитами). Среди них различают антропофильные (вызывающие заболевания у человека), зооантроиофильные (вызывающие заболевания у животных и человека).

В настоящее время известно более 400 видов патогенных грибов, являющихся возбудителями грибковых заболеваний. При поверхностных микозах (дерматомикозах) поражаются кожа и ее придатки: волосы и ногти.

Возбудителями дерматомикозов являются дерматомицеты, к которым относятся грибы родов Trichophyton, Microsporum и Epidermophyton. По данным разных авторов, этими заболеваниями болеют от 10 до 40% населения земного шара. Известно более 40 видов дерматомицетов, но в нашей стране чаще встречаются Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale, Trichophyton mentagrophytes var. gypseum, Trichophyton tonsurans, Trichophyton verrucosum, Trichophyton violaceum, Microsporum canis, реже Epidermophyton floccosum.

Микоз ногтей (онихомикоз)

Основными возбудителями микоза ногтей являются дерматомицеты (более 90%). Ведущее место занимают грибы: Trichophyton rubrum (75%), затем Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale (15%), плесневые грибы (13,6%), Epidermophyton floccosum (5%), Trichophyton violaceum и Trichophyton tonsurans (вместе около 1%).

Микоз кистей и стоп

Основным возбудителем микоза стоп является Trichophyton rubrum, на 2-м месте по распространенности стоит Trichophyton mentagrophytes var. interdigitale, на 3-м - Epidermophyton floccosum. Грибы Microsporum canis, Trichophyton mentagrophytes var. gypseum и Trichophyton verrucosum могут поражать кожу кистей как на тыльной, так и ладонной поверхностях.

Микоз гладкой кожи туловища, конечностей

Возбудителями микоза гладкой кожи являются дерматомицеты Microsporum canis, Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes var. gypseum, Trichophyton verrucosum, Epidermophyton floccosum, реже встречаются Trichophyton violaceum и Trichophyton tonsurans.

Микоз паховых складок. Эпидермофития паховая (истинная) (эпидермомикоз паховый)

Основным возбудителем микоза паховых складок является Trichophyton rubrum. Реже возбудителями могут быть T. mentagrophytes var. gypseum или Microsporum. Излюбленной локализацией этой области является эпидермофития паховая (истинная, эпидермомикоз паховый), обусловленная Epidermophyton floccosum.

Грибковые заболевания волосистой части головы (дерматомикозы волосистой части головы)

Микроспория (микроспороз) - грибковое заболевание кожи и волос, которое вызывается различными видами грибов рода Microsporum.

Различают антропофильные, зоофильные и геофильные виды грибов рода Microsporum. К антропофильному грибу относится Microsporum ferrugineum. Заражение происходит при контакте с больными или объектами, контаминированными возбудителем. Заболевание высоко контагиозное.

Зоофильным грибом является Microsporum canis. Заражение происходит от животных: кошек, чаще котят (80 - 85%), реже собак в результате непосредственного контакта с больным животным (или носителем) или при соприкосновении с предметами, загрязненными шерстью больных животных.

Трихофития - это грибковое заболевание кожи, волос, реже ногтей, обусловленное различными видами грибов рода Трихофитон (Trichophyton). Различают антропофильные и зоофильные трихофитоны. Поверхностную трихофитию вызывают антропофильные грибы, к которым относятся Trichophyton violaceum и Trichophyton tonsurans.

Заражение поверхностной трихофитией происходит при тесном контакте с больным человеком (от волос, чешуек кожи с очагов поражения, кусочков ногтей) или через инфицированные предметы (головные уборы, одежду, постельное белье, расчески, мебель, инструменты парикмахера и др.). Часто заражение происходит внутри семьи или детских коллективов.

Так как инфильтративно-нагноительную трихофитию вызывают зооантропофильные грибы, к которым относятся Trichophyton mentagrophytes var. gypseum и Trichophyton verrucosum, носителями которых являются животные, заражение инфильтративно-нагноительной трихофитией может произойти также при непосредственном контакте с мышевидными грызунами (носителями этого возбудителя) или через сено, солому, загрязненные шерстью больных трихофитией мышей. В последнее время участились случаи заболевания инфильтративно-нагноительной трихофитией после занятий в спортзале (в школе), через гимнастические маты, инфицированные шерстью больных трихофитией мышей. Основным носителем возбудителя Trichophyton verrucosum является крупный рогатый скот (телята, коровы). Заражение происходит при прямом контакте с больным животным или через инфицированные грибом предметы.

Микроспорией заболевают при контакте с домашними животными - кошками, собаками (больными или носителями) или больными людьми.

Возбудители грибковых заболеваний устойчивы к воздействию химических и физических факторов: к ультрафиолетовому излучению, атмосферному и осмотическому давлению, замораживанию, воздействию дезинфицирующих средств и пр. Хлорактивные (хлорамин, гипохлориты), кислородсодержащие соединения, альдегиды, третичные амины, полимерные производные гуанидина эффективны в отношении грибов в высоких концентрациях при длительных сроках воздействия. Спирты в отношении этих микроорганизмов малоэффективны. Более чувствительны грибы к воздействию четвертичных аммониевых соединений (ЧАС), композиций на основе катионных поверхностно-активных веществ (КПАВ), КПАВ и альдегидов, спиртов; фенольных препаратов, анолитов, препаратов на основе хлорпроизводных гидантоина, хлоризоцианурата натрия и трихлорихоциануровой кислоты.

Возбудители грибковых заболеваний выживают, находясь в патологическом материале во внешней среде от 1,5 до 10 лет.

[10-072 ] Посев на возбудителей дерматомикозов (Trichophyton spp., Microsporum spp., Epidermophyton spp.) без определения чувствительности к антимикотическим препаратам

950 руб.

Заказать

Посев на возбудителей дерматомикозов (Trichophyton spp., Microsporum spp., Epidermophyton spp.) без определения чувствительности к антимикотическим препаратам – метод микробиологической диагностики с культивированием и последующей идентификацией возбудителя поверхностных грибковых инфекций кожи и её производных без выявления его чувствительности к противогрибковым лекарственным препаратам.

Синонимы русские

Посев на возбудителя дерматофитии, культуральная диагностика дерматомикозов.

Синонимы английские

Conventional fungus culture and identification, Fungal culture (dermatophutoses).

Метод исследования

Микробиологический метод.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Волосы, ногти. соскоб.

Общая информация об исследовании

Дерматомикозы (дерматофитии) - это поверхностные грибковые инфекции, при которых поражается только кожа и ее придатки (волосы, ногти). Это наиболее распространенная группа грибковых инфекций. Группу грибов – возбудителей дерматомикозов называют дерматофитами. К дерматофитам относятся три биологических рода: Trichophyton, Epidermophyton и Microsporum. Источники инфекции - больной человек (заражение через предметы обихода - это самый частый путь инфицирования), животные (обычно щенки и котята), почва и растительные остатки.

Клинические проявления зависят от вида возбудителя, локализации поражения и состояния иммунной системы человека. Грибковая инфекция, вызванная дерматофитами, может локализоваться в области волосистой части головы, бороды и усов, ногтей, туловища, кистей и стоп, промежности. Стоит отметить, что дерматофиты могут размножаться только в ороговевших слоях эпидермиса.

Виды рода Trichophyton поражают кожу, волосы и ногти.

Виды рода Microsporum поражают волосы, кожу и очень редко ногти.

Виды Epidermophyton поражают кожу и ногти, но не волосы.

Роды дерматофитов хорошо различаются по микроморфологическим и культуральным признакам, поэтому микробиологический метод занимает важное место в диагностике этих инфекций.

При появлении роста колонии гриба отмечают такие ее признаки, как время появления и скорость роста колонии, ее размеры, цвет поверхности и обратной стороны, характер поверхности и ее рельеф, форму и край колонии, ее консистенцию и наличие врастания в субстрат. Так же проводят микроскопическое исследование, оценивая особенности структурных элементов гриба. В большинстве случаев это позволяет идентифицировать вид возбудителя.

Для чего используется исследование?

• Для идентификации возбудителя грибкового поражения кожи, волос или ногтей.

Когда назначается исследование?

• При подозрении на дерматомикоз, наличии характерной клинической картины. Особенно у пациентов, длительно принимавших антибактериальные препараты или стероидные гормоны.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружены.

Отрицательный результат – отсутствие роста грибов.

Положительный результат – выявление роста грибковой колонии на питательной среде, с указанием вида культивированного возбудителя.



• Исследование кожи и ногтевых пластинок на поверхностные микозы
• Посев Candida spp./дрожжеподобные грибы с подбором антимикотических препаратов

Кто назначает исследование?

Дерматовенеролог, инфекционист, терапевт, педиатр, врач общей практики.

Литература

1. Henry"s Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods, 23e by Richard A. McPherson MD MSc (Author), Matthew R. Pincus MD PhD (Author). St. Louis, Missouri: Elsevier, 2016. Pages 1204-1208, 1220–1222.
2. A Manual of Laboratory and Diagnostic Tests, 9th Edition, by Frances Fischbach, Marshall B. Dunning III. Wolters Kluwer Health, 2015. Pages 488-492.
3. Дерматовенерология. Национальное руководство / под ред. Ю. К. Скрипкина, Ю. С. Бутова, О. Л. Иванова. – М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. С. 234-262.
4. Сербин А.Г., Леонтьев Д.В., Россихин В.В. Основы медицинской микологии. Учебное пособие для студентов фармацевтических ВУЗов. – Харьков: 2010. С. 29-44.